TAREA NO. 2 MEDIOS DE CULTIVO

MEDIO DE CULTIVO:
Solución que cuenta con los nutrientes necesarios para recuperar, multiplicar, aislar e identificar los microorganismos (bajo condiciones favorables de temperatura y pH) así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Generalmente se presentan destacados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semis olido y líquido

.Clasificación:
Según su aspecto físico:
FosiferolíquidosSemi-sólidosSólidos duros o muy durosSegún su uso:SelectivosSelectivos de enriquecimientoDiferencialesPara cultivar gérmenes anaerobiosPara medir potencial de antibióticosDe transporte en microPara filtración através de membranaPara cultivo de hongos y levadurasPara cultivo de protozoarios

Tipos de siembraCultivo en medio sólido:
En el medio sólido cada célula viable dará origen a una colonia y por tanto la siembra en placas se puede utilizar, no solo para cultivar microorganismos, si no además para aislar y contar. En general cuando se requiere tener colonias aisladas a partir de un material determinado, es necesario dividir la muestra en tubos con suero fisiológico estéril.

Cultivo en medio líquido:
Habitualmente se realiza en tubos o en matraces. El crecimiento se puede manifestar por enturbamiento, por formación de velo o película o por sedimento.

Medios de aislamiento primario selectivo:
(Pueden ser de moderada o de alta selectividad) se añaden sustancias que inhiben el crecimiento de otras. Variando las sustancias añadidas se varía el tipo y grado de selectividad.

Medios de aislamiento primario enriquecido:
Ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado.

TAREA NO. 3 TIPOS DE TINCIONES

1-Indirecta:
En una tinción indirecta se hace interaccionar en primer lugar a una sustancia química denominada “mordiente” con el sustrato la cual permite la posterior interacción del colorante.

2-Directa:
En una tinción directa el colorante interacciona directamente con el sustrato.

3-Azul de metileno:
Es un colorante que se usa para tratar una enfermedad llamada metahemoglobinemia. Se una como tintura para teñir ciertas partes del cuerpo antes o durante la cirugía.También se utiliza como colorante en las tinciones para la observación en el microscopio.

4-Tinción de Gram:
Es un tipo de tinción diferencial empleada en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas.

5-Tensión de zhiehl Neelsen:
Es una técnica de tinción diferencial rápida y económica para la identificación de microorganismos patógenos, por ejemplo M. tuberculosis.

DEFINICION DE:Bitácora:
Termino usado para nombrar un registro escrito de las acciones que se llevaron a cabo en cierto trabajo o tarea. Esta bitácora incluye todos los sucesos que tuvieron lugar durante la realización de dicha tarea, las fallas que se produjeron, los cambios que se introdujeron y los costos que ocasionaron.Es un cuaderno en el cual los estudiantes, diseñadores, y trabajadores desarrollan su trabajo, anotan cualquier información que consideren que puede ser útil para su trabajo.

Mantenimiento preventivo:
Consiste en la revisión periódica de ciertos aspectos.Se ocupa en la determinación de condiciones operativas, de durabilidad y de confiabilidad de un equipo, este tipo de mantenimiento nos ayuda a reducir los tiempos que puedan generarse por mantenimiento correctivo.El primer objetivo del mantenimiento es evitar o mitigar las consecuencias de las fallas del equipo, logrando prevenir las incidencias antes de que estas ocurran. Las tareas de mantenimiento preventivo incluyen acciones como cambio de piezas desgastadas, cambios de aceites y lubricaciones, etc.

Mantenimiento correctivo:
Corrección de las averías o fallas, cuando estas se prestan, y no planificadamente, al contrario del caso de mantenimiento preventivo.Esta forma de mantenimiento impide el diagnostico fiable de las causas que provocan la falla, pues se ignora si fallo por mal trato, abandono, desgaste natural, etc.El ejemplo de este tipo de mantenimiento correctivo es la habitual reparación urgente tras una avería que obligo a detener el equipo o máquina dañado.

Práctica No. 1 – Medios de cultivo

Objetivo:

El objetivo de esta práctica es comenzar a conocer como se comienza a desarrollar la serie de procesos que nos llevan a un resultado, a conocer y utilizar mejor los materiales con los que vamos a trabajar el resto de las prácticas.

Introducción:

El medio de cultivo es la combinación sólida o líquida de nutrientes y agua. Usualmente incluye sales inorgánicas, carbohidratos y vitaminas y aminoácidos.

Desarrollo:

Empezamos por ponernos el equipo de bioseguridad, después fuimos por un vale de material y luego nos proporcionaron los sig materiales:-vaso de precipitado-espátula-vidrio de reloj-mechero de bunsen-balanza granataria-probeta graduada-papel para mesa-varilla de cristal-matraz erlenmeyer-medio de cultivo-cajas petri-agua destilada-agua destilada-embudo-papel secanteDespués de que nos dieron los materiales pesamos en la balanza granataria el vidrio de reloj.Continuamos haciendo la regla de tres para determinar cuantos mililitros de agua y cuantos gramos debíamos usar para rehidratar 7 cajas petri.Ya que determinamos el agua destilada y los gramos de polvo de medio de cultivo, mezclamos el agua y el polvo, se dejó reposar y luego se calentó hasta el punto de ebullición durante un minuto en el matráz erlenmeyer, y cuando enfrío un poco se taponeó con torundas de algodón y tape, se etiquetó debidamente y se metió al autoclave a esterilización. Siguiendo el método de esterilización por calor húmedo ya visto anteriormente.Ya que salió del autoclave esterilizado, se vertió el líquido a las cajas petri cuidadosamente para evitar que se contaminara y se espero a que el líquido se volviera gelatina.Se estivaron las cajas de toda la mesa, se etiquetaron con sus respectivos datos y se los entregamos al maestro.

Conclusión:

Esta primera práctica nos ayudó a introducirnos un poco más realmente a lo que es el laboratorio y nos enseñó a tener precaución a la hora de trabajar con todos los materiales que utilizamos y a dividirnos el trabajo en equipo para lograr un mejor resultado aunque fuera más tardado de lo normal, con el tiempo y las prácticas que vayamos desarrollando más adelante se irá aumentando la velocidad en el trabajo hasta que el tiempo que demore sea el normal.

Práctica No. 3 Siembras en medios de cultivo.

Objetivo:

El objetivo de ésta práctica es aprender a realizar una siembra en medios de cultivo realizados anteriormente utilizando saliva, muestra interdental, orina, agua de la calle, verduras y muestras de sangre.



Introducción:

Se entiende por siembra la operación que consiste en depositar un germen asépticamente en un medio de cultivo. Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales:Practicarla en medios de cultivos favorables y previamente esterilizados.Emplear instrumentos asépticos.No contaminar ni destruir el inóculoDepositarla asépticamente en los medios elegidosEsterilizar los instrumentos empleados antes y después de cada operación.



Desarrollo:

Al igual que en la primera práctica nos pusimos nuestro equipo de bioseguridad, nos dieron el vale de materiales y lo que necesitamos fue esto:5 a 7 cajas petri de medio de cultivoAsa bacteriológicaVaso de precipitado con 25 ml. De agua destilada2 mecheros de bunsenPapel para mesaMasking tapeTorundas de algodón secas y con alcoholPorta objetosDespués de que nos dieron los materiales y encendimos los mecheros para crear el campo estéril y poner todas las cajas petri en el centro procedimos a tomar la respectiva muestra que se requería para cada tipo de cultivo y la sembramos estriada, y dependiendo de cada muestra es el material que se utilizó para tomarla.Al final de la siembra sólo tapamos las cajas, se estivaron de nuevo y se las devolvimos al maestro para esperar a que crecieran las bacterias.



Conclusión:

Esta práctica en sí no es difícil, pero se tiene que tener mucho cuidado al momento de tomar la muestra y en especial con la técnica de veno punción, no lleva mucho tiempo pero se requiere tener práctica para lograr hacerlo más rápido.

Práctica No. 4 Observación macroscópica de colonias de microorganismos bacteriológicos

Objetivos:

El objetivo de ésta práctica es observar macroscópicamente si ya crecieron algunas colonias de bacterias en el medio de cultivo que en la práctica pasada sembramos.

Introducción:

Observar macroscópicamente significa en ésta práctica ver sin ayuda del microscopio las colonias crecidas en el medio de cultivo, observar su color, su olor o si las colonias son chicas, medianas o grandes.

Desarrollo:

Después de colocarnos nuestro equipo de bioseguridad nos proporcionaron nuestras respectivas cajas para observarlas después de 72 horas, verificamos su color, olor y tamaño de las colonias desarrolladas.

Conclusión:Después de haber hecho ésta práctica llego a la conclusión de que por falta de seguir correctamente las indicaciones algunos sembrados no dieron resultado, no creció ninguna colonia.

Práctica No. 5 Frotis

Objetivo:

El objetivo de ésta práctica es poder ver al microscopio las bacterias de las colonias que crecieron en el medio de cultivo, después de la tinción de Gram.

Introducción:

Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un porta objetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida.

Desarrollo:

Comenzamos por ponernos nuestro equipo de bioseguridad y nos dieron un vale de material, entonces éstos fueron los materiales utilizados:Asa bacteriológicaVaso de precipitado de 50 con 25 ml de agua destilada2 mecheros de bunsenGas LPPapel secanteTorundas de algodón secas y con alcoholNos dieron nuestras cajas petri otra vez y con el asa bacteriológica esterilizada tomamos aprox. una gota de agua destilada y la colocamos sobre el porta objetos para después volver a pasar el asa por la flama y tomar un poco de la colonia y revolverla dispersándola con la misma asa en el porta objetos hasta que quedara delgado.

Conclusión:

Se tiene que tener mucho cuidado de hacer que el frotis quede bien distendido para que al momento de teñirlo se pueda ver bien al microscopio, también hay que tener cuidado de estar esterilizando el asa cada vez que queramos agregarle mas agua o cultivo.

Práctica No. 6-7 Tinción de Gram. Y Observación microscópica

Objetivo:

Teñir el frotis elaborado el la práctica anterior para después observarlo en el microscopio y ver a los microorganismos del medio de cultivo.

Introducción:

La tinción de Gram. es el proceso para teñir el frotis a manera que se puedan ver los organismos en el microscopio cómodamente, y para esto al finalizar la tinción hay que agregar una gota de aceite de inmersión y poner el microscopio con el objetivo 100 x

Desarrollo:

Al entrar al laboratorio como siempre lo primero es el equipo de bioseguridad y después nos entregaron los frotis elaborados anteriormente para empezar con la tinción de Gram.Para la tinción sumergimos el frotis en cristal violeta durante 1 min., después lo lavamos con lugol por otro minuto y escurrimos y decoloramos en alcohol hasta que ya no arrastrara mas cristal violeta y luego lo lavamos con agua corriente y contrastamos con fucsina 1 minuto mas y lavamos con agua corriente.Ya que terminamos de teñir proseguimos con la parte final de la práctica, que fue colocarle al frotis 1 gota de aceite de inmersión para observar en el microscopio con el objetivo 100 x.

Conclusión:

La práctica salio bien, no estuvo difícil el procedimiento, solo es no saltarse ningún paso en la tinción y saber enfocar.